移動(dòng)核酸檢測車高度集成了車輛及實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)，具有良好的運(yùn)輸性及P2+實(shí)驗(yàn)室功能，車內(nèi)具備負(fù)壓防護(hù)、送風(fēng)凈化、排風(fēng)生物安全高效過濾功能，符合《移動(dòng)式實(shí)驗(yàn)室生物安全要求》標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于生物安全二級實(shí)驗(yàn)室要求，實(shí)驗(yàn)室送排風(fēng)系統(tǒng)關(guān)鍵指標(biāo)滿足相應(yīng)國家標(biāo)準(zhǔn)。作為移動(dòng)的核酸實(shí)驗(yàn)室，檢測車有不同的規(guī)格，按照其實(shí)驗(yàn)室規(guī)模一般來說大致分為兩類：一類規(guī)模較小，車內(nèi)結(jié)構(gòu)主要包括潔凈走廊、試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)和若干小緩沖間。這類檢測車靈活、便捷，日檢測量一般為2000-3000管；另一類規(guī)模相對較大，主要體現(xiàn)在樣本處理區(qū)和擴(kuò)增區(qū)更大，同時(shí)還視情況配備了洗消間，這類檢測車相當(dāng)于一個(gè)移動(dòng)式方艙，日檢測量可達(dá)6000-10000管以上。

一、檢測車應(yīng)用場景

P2+移動(dòng)核酸檢測車主要用于應(yīng)急核酸檢測，由于其部署方便，可根據(jù)需要派往不同的地方。在進(jìn)行大規(guī)模核酸篩查時(shí)，往往以檢測車隊(duì)的形式（一般3-4臺(tái)檢測車以上）駐扎在醫(yī)院、方艙基地、廣場、社區(qū)采樣點(diǎn)或野外等。駐扎的場所大小根據(jù)檢測車大小及數(shù)量而定，同時(shí)需要持續(xù)供應(yīng)的水電系統(tǒng)。

在前面幾次實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)中，我院檢測車與湖南省人民醫(yī)院、湖南省疾控中心的檢測車共同駐扎在張家界市人民醫(yī)院的操場進(jìn)行集中檢測；后來按命令前往桑植，單獨(dú)駐扎在桑植縣人民醫(yī)院進(jìn)行檢測；在本次懷化抗疫過程中，再次與湖南省人民醫(yī)院、湖南省疾控中心、湘雅醫(yī)院的3臺(tái)檢測車共同組成檢測車隊(duì)駐扎在鶴城體育中心方艙基地開展集中檢測。

值得注意的是，為了極大程度保證核酸檢測車的正常運(yùn)轉(zhuǎn)，檢測車或檢測車隊(duì)需要配備一名隨車工程師，便于監(jiān)測檢測車的運(yùn)行狀態(tài)，及時(shí)處理相應(yīng)的問題（如壓差、環(huán)境溫濕度故障等）。

二、檢測車設(shè)備及人員配置

P2+移動(dòng)核酸檢測車的檢測量主要依賴于儀器設(shè)備及人員配備。

移動(dòng)核酸檢測車的試劑準(zhǔn)備區(qū)配備超凈工作臺(tái)、冷藏冰箱、冷凍冰箱、瞬時(shí)離心機(jī)以及不同規(guī)格的移液器若干；樣本處理區(qū)配備全自動(dòng)核酸提取儀、生物安全柜、冷藏冰箱、冷凍冰箱、瞬時(shí)離心機(jī)、不同規(guī)格的移液器若干；擴(kuò)增區(qū)配備冷藏冰箱、瞬時(shí)離心機(jī)以及PCR擴(kuò)增儀等。

在進(jìn)行大規(guī)模核酸篩查時(shí)，核酸提取儀的規(guī)格及數(shù)量、擴(kuò)增儀的數(shù)量直接影響每日檢測量。受限于檢測車空間，核酸提取儀和擴(kuò)增儀的體積不應(yīng)過大。在樣本處理區(qū)，建議至少配備1臺(tái)96通道的核酸提取儀，或者至少3臺(tái)32通道（或64通道）的核酸提取儀；在理想情況下，1臺(tái)96通道核酸提取儀再搭配1臺(tái)32通道核酸提取儀可以滿足各類篩查需求。在擴(kuò)增區(qū)，建議配備至少2-3臺(tái)96通道PCR擴(kuò)增儀。

對于人員配備，基于不同的篩查需求可以進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整。一般而言，檢測車每班次的總?cè)藛T為4人左右，其中試劑準(zhǔn)備區(qū)配備1人，樣本處理區(qū)配備2人左右（不超過3人），擴(kuò)增區(qū)配備1人，具體人員及崗位設(shè)置如表1。

在人員有限的情況下，每班次至少需3人，試劑配制崗位及核酸擴(kuò)增崗位可由1人兼顧，樣本處理崗位2人。在進(jìn)行大規(guī)模核酸篩查時(shí)，建議每臺(tái)檢測車配備10-12人，每天根據(jù)工作量可以分為3個(gè)班次，考慮到檢測車內(nèi)空間狹小，建議每個(gè)班次時(shí)間為6小時(shí)左右，不超過8小時(shí)，我們本次前往懷化支援便是這種情況。在人員緊缺時(shí)，每臺(tái)車建議至少配備8人，根據(jù)工作量可以分為2-3個(gè)班次（6-8小時(shí)/班次），去年張家界支援時(shí)我們便是采用的這類人員配制。需要注意的是，在執(zhí)行任務(wù)過程中，當(dāng)檢測車人員不夠需要進(jìn)行增補(bǔ)時(shí)，一定要做好人員培訓(xùn)并在正式開展檢測工作前完整地將流程運(yùn)行一次。

根據(jù)我們已有的實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)，按照每日3個(gè)班次，且每班至少能保證3人的情況下，若配備2臺(tái)擴(kuò)增儀，檢測車每日檢測量可達(dá)到2000管；若配備3臺(tái)擴(kuò)增儀，檢測車每日檢測量可達(dá)到3000-3500管。在我們本次懷化抗疫過程中，前半程由于檢測車的擴(kuò)增儀只有2臺(tái)，檢測車每輪篩查（約16小時(shí)）的產(chǎn)量維持在1500管左右；后半程通過增加1臺(tái)擴(kuò)增儀，產(chǎn)量激增至3000管左右。另外值得一提的是，如果檢測車駐扎的檢測基地有充足的擴(kuò)增儀，在嚴(yán)格保證生物安全及保存條件的情況下，可以協(xié)調(diào)轉(zhuǎn)送部分樣本模板送至車外的擴(kuò)增儀進(jìn)行擴(kuò)增，可進(jìn)一步提高整體檢測量。

三、儀器試劑的性能驗(yàn)證

根據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊（試行第二版）》中的要求，實(shí)驗(yàn)室在開展臨床標(biāo)本檢測前，應(yīng)對由提取試劑、提取儀、擴(kuò)增試劑、擴(kuò)增儀等組成檢測系統(tǒng)進(jìn)行必要的性能驗(yàn)證，至少包括重復(fù)性和最低檢測限的驗(yàn)證；如果檢測中存在不同廠家的儀器，還需要對不同儀器的結(jié)果進(jìn)行比對。只有在滿足性能驗(yàn)證的要求后再進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。此外，更換試劑批號(hào)前也需要進(jìn)行批號(hào)更換的比對。

四、檢測流程的梳理

P2+移動(dòng)核酸檢測車和普通PCR實(shí)驗(yàn)室的檢測流程大體相同，進(jìn)行嚴(yán)格的生物安全防護(hù)后，按照PCR實(shí)驗(yàn)室分區(qū)進(jìn)行相關(guān)檢測活動(dòng)。

開展核酸檢測前需首先核查車內(nèi)控制面板相關(guān)參數(shù)是否正常（如壓差、溫濕度等）。檢測車內(nèi)的試劑配制、核酸提取和擴(kuò)增等流程和普通PCR室基本相同，然而標(biāo)本的簽收及分揀和醫(yī)療廢物的處理環(huán)節(jié)一般不在檢測車上進(jìn)行（流程見圖1）。送往檢測車的標(biāo)本一般會(huì)在在車外集中進(jìn)行簽收、入庫及編號(hào)，并由專人轉(zhuǎn)送至檢測車的“標(biāo)本傳遞窗”；而所有的醫(yī)療廢物打包后也會(huì)統(tǒng)一帶出車外進(jìn)行相應(yīng)的消殺處理。因此，標(biāo)本轉(zhuǎn)送至檢測車之前的流程以及醫(yī)療廢物出檢測車之后的流程需要根據(jù)檢測車具體駐扎的基地（如方艙基地、醫(yī)院等）而定并進(jìn)行有效銜接。

此外需要注意的是，檢測車在執(zhí)行任務(wù)時(shí)往往以檢測車隊(duì)或依托于方艙基地開展應(yīng)急核酸檢測，因此作為臨時(shí)的檢測機(jī)構(gòu)，需要與當(dāng)?shù)叵嚓P(guān)部門進(jìn)行對接和協(xié)調(diào)。根據(jù)國務(wù)院應(yīng)對新型冠狀病毒肺炎疫情聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制綜合組最新發(fā)布《區(qū)域新型冠狀病毒核酸檢測組織實(shí)施指南（第三版）》中的要求，區(qū)域進(jìn)行大規(guī)模核酸篩查時(shí)需要成立9個(gè)工作專班，包括檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)、采檢人員匹配、樣本轉(zhuǎn)運(yùn)、陽性結(jié)果處置、物資保障、質(zhì)量控制、醫(yī)廢處置、信息化保障、綜合管理等。因此，移動(dòng)核酸檢測車在正常運(yùn)行時(shí)除應(yīng)考慮與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的流程和人員安排外，還需要與上述專班的相關(guān)人員或部門進(jìn)行協(xié)調(diào)，才能保證大規(guī)模核酸篩查檢測工作的有序順利開展。

在本次懷化抗疫過程中，前期由于方艙基地標(biāo)本的簽收與轉(zhuǎn)運(yùn)流程不暢影響了整體的檢測速度，甚至一度出現(xiàn)了標(biāo)本信息混亂的局面。通過指揮部的統(tǒng)一安排，檢測車隊(duì)與氣膜方艙實(shí)驗(yàn)室協(xié)調(diào)后，車隊(duì)專門派出3名隊(duì)員參與方艙基地標(biāo)本的前處理，從而規(guī)范了標(biāo)本的入庫及轉(zhuǎn)送流程，也有效避免了由于標(biāo)本運(yùn)送不及時(shí)而出現(xiàn)檢測車樣本處理區(qū)的隊(duì)員穿著防護(hù)服等標(biāo)本的尷尬局面。

五、質(zhì)量控制

P2+移動(dòng)核酸檢測車實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制與普通PCR實(shí)驗(yàn)室要求一致，根據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊（試行第二版》要求規(guī)范開展室內(nèi)質(zhì)控。每批檢測至少有1份弱陽性質(zhì)控品（第三方質(zhì)控品，通常為檢出限的1.5-3倍）、3份陰性質(zhì)控品（生理鹽水）。根據(jù)《區(qū)域新型冠狀病毒核酸檢測組織實(shí)施指南（第三版）》中的要求，在大規(guī)模人群篩查時(shí)，單采樣本檢測結(jié)果陽性時(shí)，復(fù)核確認(rèn)后，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)立即上報(bào)當(dāng)?shù)匦鹿谝咔槁?lián)防聯(lián)控指揮部?；觳蓹z測陽性時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用原始樣本+原始核酸進(jìn)行雙試劑復(fù)核確認(rèn)后再上報(bào)指揮部指定部門，指揮部按照指南要求進(jìn)一步啟動(dòng)混管追陽流程（見圖2）。

因此，檢測車最好能準(zhǔn)備兩種擴(kuò)增試劑以備陽性結(jié)果的復(fù)查。在未準(zhǔn)備另一種試劑的情況下，陽性結(jié)果可以通過基地的其他檢測車或檢測單位進(jìn)行復(fù)查。此外，在審核結(jié)果時(shí)，針對突然出現(xiàn)較多的陽性結(jié)果時(shí)，一定要考慮是否出現(xiàn)了檢測車污染，并及時(shí)排查。

六、生物安全及風(fēng)險(xiǎn)防范注意事項(xiàng)

P2+移動(dòng)核酸檢測車運(yùn)行過程中的生物安全相關(guān)要點(diǎn)與常規(guī)的PCR實(shí)驗(yàn)室基本一致，根據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊（試行第二版）》中的要求采取相應(yīng)等級的生物安全防護(hù)。在檢測車操作時(shí)，為了盡量減少相應(yīng)的生物安全及質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)，需要重點(diǎn)關(guān)注以下幾個(gè)方面：

1. 檢測車內(nèi)三個(gè)主要區(qū)域內(nèi)的相關(guān)設(shè)備及耗材需要嚴(yán)格區(qū)分，不能混用；標(biāo)本或物品流通的方向嚴(yán)格按照負(fù)壓方向傳遞。

2. 建立人員和標(biāo)本運(yùn)轉(zhuǎn)流程：檢測車外要設(shè)置相對獨(dú)立的人員通道、標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)以及污物通道，且需要通過警戒線等方式進(jìn)行阻隔。檢測人員穿戴防護(hù)用品的區(qū)域可以在檢測車的潔凈走廊或是在檢測車外單獨(dú)隔離出來的潔凈區(qū)域。

3.試劑配制：試劑配制需要在超凈工作臺(tái)操作，試劑需要新鮮配制，未使用完時(shí)必須冷藏，且在24小時(shí)內(nèi)使用；試劑放置在傳遞窗時(shí)，嚴(yán)禁紫外燈照射；此外試劑配制人員應(yīng)穿戴好防護(hù)用品，嚴(yán)格注意避免混入人源性物質(zhì)污染，影響結(jié)果判斷。

4.核酸提取：在進(jìn)入核酸提取區(qū)時(shí)必須進(jìn)行三級生物安全防護(hù)，出倉前務(wù)必按正確步驟脫防護(hù)服及進(jìn)行手消毒；樣本處理前需充分混合（尤其是混采樣本），核酸提取或加樣過程中避免出現(xiàn)標(biāo)本溢灑；核酸提取時(shí)一定要插入磁套，避免污染；單獨(dú)進(jìn)行陽性對照或陽性質(zhì)控點(diǎn)樣時(shí)一定要謹(jǐn)防污染其他孔，且加樣槍頭及時(shí)消殺。

5.PCR擴(kuò)增：擴(kuò)增前，需確保8聯(lián)管蓋子一定要蓋緊，進(jìn)行擴(kuò)增前務(wù)必離心；取出擴(kuò)增后的8聯(lián)管時(shí)需要注意是否爆管和泄露，且需要及時(shí)轉(zhuǎn)入塑料袋封口打包處理；陽性樣本的擴(kuò)增產(chǎn)物需要及時(shí)消殺。

6.醫(yī)廢處置：醫(yī)療廢物的處理是控制實(shí)驗(yàn)室安全的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，必須嚴(yán)格執(zhí)行醫(yī)療垃圾的處理程序；醫(yī)療廢物三層打包，尤其是提取深孔板打包時(shí)謹(jǐn)防出現(xiàn)破損或打包不嚴(yán)實(shí)發(fā)生泄露；檢測車外建議設(shè)立臨時(shí)醫(yī)廢放置點(diǎn)，每天需要相關(guān)人員及時(shí)轉(zhuǎn)運(yùn)并消殺；當(dāng)出現(xiàn)陽性結(jié)果時(shí)，所有的醫(yī)廢均需要進(jìn)行統(tǒng)一的高壓滅菌后再處理。對于空間有限的檢測車而言，為避免污染，高壓滅菌不建議在車內(nèi)進(jìn)行。

七、后勤保障

后勤保障也是移動(dòng)核酸檢測車能夠有效運(yùn)轉(zhuǎn)的重要部分。在執(zhí)行任務(wù)時(shí)，由于空間所限，檢測車事先準(zhǔn)備的相關(guān)耗材物資可能并不足以支撐全程篩查任務(wù)，因此需要及時(shí)補(bǔ)充。檢測車所需要的所有物資，包括試劑、防護(hù)用品等耗材以及檢測人員的餐食等均需要臨時(shí)建立起物資保障體系保障，建議提前做好物資供應(yīng)清單，在正式進(jìn)行檢測前與當(dāng)?shù)叵嚓P(guān)部門協(xié)調(diào)好。當(dāng)然，如果檢測車駐扎在方艙基地，相關(guān)的后勤保障則可以通過基地統(tǒng)一協(xié)調(diào)管理。

以上是在參與檢測車執(zhí)行應(yīng)急核酸檢測任務(wù)過程中的的經(jīng)驗(yàn)和體會(huì)?？偟膩碚f可以歸納為幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)：1.檢測車人員應(yīng)配置合理并培訓(xùn)到位；2.檢測車內(nèi)提取儀和擴(kuò)增儀等儀器需合理搭配；3.檢測流程通暢，與駐扎基地其他檢測單位協(xié)調(diào)配合；4.嚴(yán)格執(zhí)行質(zhì)量控制；5.生物安全與風(fēng)險(xiǎn)防范意識(shí)尤其需要加強(qiáng)。

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